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梭菌顯色培養(yǎng)基的應(yīng)用

更新時(shí)間:2019-07-25  |  點(diǎn)擊率:1268

產(chǎn)氣莢膜梭菌( Clostridium perfringens) 是一種革蘭陽(yáng)性厭氧菌能夠引起食物中毒和壞死性腸炎等疾病該菌是臨床上氣性壞疽病原菌中常見(jiàn)的一種梭菌,在體內(nèi)能形成莢膜能分解肌肉和結(jié)締組織中的糖,產(chǎn)生大量氣體從而導(dǎo)致組織嚴(yán)重氣腫,繼而影響血液供應(yīng),造成組織大面積壞死美國(guó)疾病預(yù)防控制中心數(shù)據(jù)顯示,產(chǎn)氣莢膜梭菌已成為繼彎曲菌和沙門(mén)菌之后的又一大引起細(xì)菌性食物中毒的常見(jiàn)致病菌。

 

產(chǎn)氣莢膜梭菌也是一種重要的飲用水指示菌,我國(guó)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 飲用天然礦泉水檢驗(yàn)方法》GB8538—2016規(guī)定,天然礦泉水產(chǎn)品和水源水中必須檢測(cè)產(chǎn)氣莢膜梭菌。

 

目前國(guó)內(nèi)對(duì)產(chǎn)氣莢膜梭菌的檢測(cè)主要利用的是傳統(tǒng)的生化培養(yǎng)方法,如利用液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(FT)、亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂基礎(chǔ) (SPS)以及胰?-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(chǔ)(TSC)進(jìn)行分離培養(yǎng),步驟較多且需要大量復(fù)雜的確認(rèn)實(shí)驗(yàn),整個(gè)過(guò)程至少需要 4天時(shí)間,不利于檢測(cè)部門(mén)及時(shí)報(bào)告結(jié)果 ,嚴(yán)重影響產(chǎn)氣莢膜梭菌檢測(cè)的效率及準(zhǔn)確性。

 

梭菌顯色培養(yǎng)基(貨號(hào):M2026,HiCrome™ Clostridial Agar Base)【需添加劑:產(chǎn)氣莢膜桿菌添加劑II(貨號(hào):FD012,Perfringens Supplement II)】根據(jù)該菌產(chǎn)生特異性酶從而快速對(duì)產(chǎn)氣莢膜梭菌進(jìn)行定性和定量分析。與傳統(tǒng)培養(yǎng)基相比,產(chǎn)氣莢膜梭菌顯色培養(yǎng)基具有更高的準(zhǔn)確性和更快的檢測(cè)速度,厭氧條件下35-37℃孵育24-48小時(shí),即可觀察接種反應(yīng)(如下圖)。產(chǎn)氣莢膜梭菌顯色培養(yǎng)基利用該菌產(chǎn)生特異性酶,其特異性和靈敏度均較高,在初級(jí)分離中就可以對(duì)產(chǎn)氣莢膜梭菌進(jìn)行分離與鑒定。

 

 

培養(yǎng)基中的胰蛋白胨提供必需的營(yíng)養(yǎng)素,主要是氮源化合物。酵母提取物作為B族維生素的來(lái)源。葡萄糖是可發(fā)酵的碳水化合物。硫乙醇酸鈉是還原劑,有助于產(chǎn)生低氧還電位,從而促進(jìn)梭菌的生長(zhǎng)。此外,培養(yǎng)基通過(guò)添加額外成分,能很好地支持梭菌屬的繁茂生長(zhǎng)。而選擇性添加劑可以抑制其他腸道細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖。

 

接種梭菌瓊脂的理想方法是用樣品(在管中)直接接種在無(wú)菌冷卻的培養(yǎng)基上,或者劃線接種。

 

HiMedia公司是微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商,一直致力于微生物培養(yǎng)基和細(xì)胞培養(yǎng)基的研發(fā)和生產(chǎn),其顯色培養(yǎng)基有80多種,涵蓋各個(gè)領(lǐng)域,包括無(wú)動(dòng)物源成分及化學(xué)限定的,并具有WHO-GMP認(rèn)證、ISO9001,ISO13485認(rèn)證,CE和FDA注冊(cè)登記。其產(chǎn)品行銷(xiāo)140多個(gè)國(guó)家。

 

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