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衰老加劇核糖體“罷工”并破壞蛋白穩(wěn)態(tài)平衡

更新時間:2022-02-14  |  點擊率:709

“塵滿面、鬢如霜",衰老是每個生命的必經(jīng)之路。而死亡,是衰老的終點。如何抵抗衰老進程,自古以來就是一個“熱點話題"

人類對于“長生不老"這件事,從來都很執(zhí)著:始皇帝海外求仙丹;道家外丹黃白術(shù)在中國盛行了近兩千年;各種植物也被賦予長壽的含義:人參果、桃子等等;甚至連《西游記》中的妖怪,都想來上一口唐僧肉長生不老。

但隨著科學(xué)技術(shù)的進步,我們已經(jīng)不再寄希望于各種金丹,而是通過分子、細胞等更為科學(xué)嚴謹?shù)氖侄危瑏斫忉屗ダ系脑?,力求從根源上延?/span>。

近日,《Nature》上發(fā)表了一篇標題為:“Ageing exacerbates ribosome pausing to disrupt cotranslational proteostasis"的文章,以秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditis elegans)和釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)為模型,發(fā)現(xiàn)了衰老的秘密:衰老可以改變翻譯動力學(xué)——通過引起核糖體“罷工",加劇蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)失衡過程。

衰老的九大特征

START OF SPRING

已有研究(《Cell》上發(fā)表的綜述性文章“The Hallmarks of Aging")在從分子角度上總結(jié)了衰老的九大特征:

衰老伴隨著細胞蛋白平衡的下降,這是許多與年齡相關(guān)的蛋白質(zhì)錯誤折疊引發(fā)的疾病的基礎(chǔ)。

然而,衰老是如何損害蛋白平衡的?這仍是個未解。

對于蛋白平衡網(wǎng)絡(luò)而言,新生多肽是一種巨大的負擔。研究人員假設(shè),衰老過程中翻譯效率的改變,可能會對推動蛋白平衡的崩潰起促進作用。

在這項研究中,科研人員發(fā)現(xiàn),衰老改變了秀麗隱桿線蟲和釀酒酵母的翻譯伸長動力學(xué)。

在衰老的酵母和蠕蟲的特定位置,核糖體占位(即核糖體出現(xiàn)“罷工"的情況)增加,這些占位情況較為集中地出現(xiàn)在與蛋白穩(wěn)態(tài)和翻譯相關(guān)的基因上,以及在共翻譯泛素化的多肽鏈所對應(yīng)的基因上。并且還表現(xiàn)出一定的氨基酸偏好,而年輕的細胞中也存在這些細胞。這就意味著,年輕細胞中也存在核糖體“罷工"的情況。

而這種“罷工"時間一旦延長,就會導(dǎo)致核糖體碰撞增加,通俗點講就是核糖體出現(xiàn)“追尾",形成雙核糖體、三核糖體。進一步研究表明,衰老的的細胞中多核糖體現(xiàn)象更為普遍。

核糖體碰撞對于細胞而言來說是有害的,細胞會在此時啟動核糖體相關(guān)質(zhì)量控制機制(ribosome-associated quality control,RQC)來新生肽鏈。值得注意的是,衰老的酵母細胞表現(xiàn)出RQC底物清除受損和聚集增加等現(xiàn)象,表明衰老壓倒了這一途徑。

事實上,長壽的酵母突變體減少了年齡依賴的核糖體“罷工",并且延長了壽命。進一步翻譯改變與蛋白平衡崩潰聯(lián)系起來,研究人員發(fā)現(xiàn)線蟲中顯示年齡依賴核糖體“罷工"的新生多肽,在年齡依賴的蛋白聚集體中強烈富集。

值得注意的是,衰老增加了許多蛋白平衡成分的停頓和聚集,這可能會啟動一個蛋白平衡崩潰的循環(huán)。

研究人員認為,核糖體“罷工"的增加,導(dǎo)致RQC超載和新生多肽聚集,在衰老過程中對蛋白平衡損害和全身衰退有重要作用。

PCR污染控制

在這項實驗中,科研人員用到了不少PCR相關(guān)技術(shù),而PCR實驗室中,DNA污染很難*清除。即使只有一個污染的DNA分子被檢測到,也會使整個PCR檢測過程出現(xiàn)誤差。

為確保PCR試驗數(shù)據(jù)準確,預(yù)防DNA或RNA交叉污染,PCR實驗室大多會常備DNA/RNA污染清除劑。

Minerva Biolabs PCR Clean™DNA/RNA污染清除劑:

特點:

1. 快速有效地清除DNA或RNA污染。1分鐘起效。

2. 可直接使用。

3. 保護實驗人員,避免接觸DNA污染。

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PCR Clean™噴霧劑使用方法:

1. 將PCR Clean™噴在操作臺表面,反應(yīng)1分鐘后,即可用干凈紙巾擦干試劑。注意:如果沒有擦拭干凈,液體揮發(fā)后表面可能有白色殘留,影響美觀。此時可用噴壺噴灑蒸餾水到白色殘留處,然后擦拭即可。

2. 對于移液器要祛除DNA/RNA污染時,請按照說明書拆開移液器,將移液器桿軸浸泡在PCR Clean™噴霧劑中, 1分鐘后取出后用水沖洗,晾干,重新組合。

3. 將PCR Clean™桶裝,可用于補充到噴霧劑瓶中,或用于潔凈間地板等大面積清除DNA/RNA污染

儲存條件

室溫保存,效期至少12個月。

低溫可能會形成沉淀,但在37℃迅速溶解。

即使在65°C條件下存放兩周,也不會影響噴霧劑的祛除效果。


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